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État de l’art pour le diagnostic de l’infection par le VIH

Les tests diagnostiques du virus de l’immunodéficience humaine ont connu une évolution considérable depuis l’introduction du premier dosage immuno-enzymatique EIA et Western blot il y a des décennies. Les méthodes plus récentes détectent les infections plus rapidement et produisent des résultats beaucoup plus rapides. Les tests de détection d’anticorps anti-VIH ont été approuvés par la Food and Drug Administration depuis novembre. Quatre de ces tests peuvent être effectués sur le lieu de soins et non cliniques car ils utilisent du sang total ou oral et sont simples à réaliser. la détection de l’ARN du VIH a été approuvée par la FDA pour détecter l’infection par le VIH avant la séroconversion et pour confirmer les résultats des tests de dépistage réactif; Ces nouvelles technologies de dépistage offrent des possibilités uniques de diagnostiquer l’infection par le VIH parmi les personnes estimées aux États-Unis qui ne savent pas qu’elles sont infectées par le VIH.

En, la Food and Drug Administration des États-Unis a homologué le premier EIA pour dépister les anticorps anti-VIH, et peu de temps après le Western blot a été approuvé pour confirmer l’infection par le VIH. Depuis ce temps, de nombreux nouveaux tests sont disponibles. En outre, une étude menée par l’Association des laboratoires de santé publique a révélé que soixante-trois pour cent des laboratoires de santé publique et de nombreux laboratoires commerciaux utilisaient encore le système Vironostika HIV-Microelisa Biomerieux, test introduit d’abord dans celui qui détecte le VIH plus tard au cours de l’infection, par rapport aux tests les plus récents L’adoption généralisée des nouveaux tests rapides d’anticorps est un élément essentiel de la stratégie multiforme avancée par les CDC. prévenir l’infection par le VIH Comme plus de gens sont testés dans le système de soins de santé, les établissements qui t être capable de le faire avec précision et rapidité Aussi, il est souvent essentiel de donner les résultats des tests pendant la visite de dépistage parce que beaucoup de gens ne reviennent pas pour recevoir des résultats lors d’une visite de suivi. Les tests VIH rapides permettent de réaliser le test en quelques minutes, sans avoir besoin d’une visite de retour, et augmentent considérablement le nombre de personnes qui reçoivent des tests positifs. leurs résultats de test Bien que de nombreux cliniciens ne sachent pas quel dosage spécifique sera utilisé lorsqu’ils commandent un test de dépistage du VIH, les tests diffèrent considérablement. Cet article présente une brève revue de l’histoire technologique du développement du test VIH; décrit les nouveaux tests rapides; et discute des problèmes, tels que le choix du test de confirmation et le besoin de jugement clinique et de suivi, soulevé par l’utilisation des nouvelles méthodes

Test de dépistage du VIH: perspectives pathogènes et historiques

Des études montrent que la transmission virale peut être la plus élevée immédiatement après l’infection et que les personnes qui apprennent qu’elles sont infectées réduisent considérablement les comportements susceptibles de transmettre le VIH . infectés peuvent faire beaucoup pour stopper la propagation des HIVEIA, initialement développés pour dépister le VIH, ont évolué pour détecter le VIH plus tôt au cours de l’infection. EIA de première génération, par exemple, système Vironostika HIV-Microelisa et EIA de seconde génération, par exemple, systèmes génétiques RLAV EIA; Les laboratoires Bio-Rad détectent les anticorps IgG contre le VIH- Les EIA de troisième génération utilisent des techniques de “sandwich à l’antigène” qui détectent également les anticorps IgM contre le VIH, qui se développent plus tôt après l’infection. des anticorps contre le VIH et le VIH; deux EIA, les Genetic Systems HIV- / HIV-Plus O EIA Bio-Rad Laboratories et les Advia Centaur HIV / O / Enhanced EHIV EIA Bayer HealthCare, détectent également des anticorps contre le VIH-groupe O Ce dernier, approuvé par la FDA en juillet, utilise une plate-forme «accès aléatoire» qui permet au technicien de sélectionner l’EIA VIH parmi les différents dosages chargés dans le système automatisé et génère des résultats de tests VIH en min. EIA de quatrième génération largement utilisés dans d’autres pays industrialisés; car ils détectent à la fois l’anticorps anti-VIH et l’antigène p La demande d’approbation d’une EIE de quatrième génération est attendue dans un proche avenir. La figure dépeint le moment auquel l’infection par le VIH peut être détectée par chacun des différents tests. après l’infection, après quoi l’amplification des acides nucléiques tests NAAT peuvent détecter l’ARN du VIH Les différentes générations d’EIA de dépistage commencent à détecter les anticorps anti-VIH – semaines plus tard, es avant que les résultats d’un Western blot conventionnellement utilisé pour la confirmation soient positifs

Figure Voir grandDownload slideTime à la détection du VIH pour différentes générations de tests diagnostiques, par rapport aux temps d’apparition des symptômes et de détection de l’antigène p et de l’ARN du VIH Les données proviennent de Figure de l’apparition des symptômes et de la détection de l’antigène p et de l’ARN VIH Les données proviennent de

Tests rapides du VIH

Les tests rapides du VIH sont des EIA à usage unique qui contiennent tous les réactifs nécessaires et donnent des résultats en ⩽ min. Comme les résultats des tests rapides sont disponibles rapidement, les personnes peuvent apprendre leurs résultats au cours de la même visite et bénéficier ainsi d’un traitement précoce. Survie à long terme et qualité de vie Des tests VIH rapides sont également essentiels lorsque des résultats immédiats sont nécessaires pour prendre des décisions sur le traitement. Dans un exemple, les femmes enceintes dont le statut sérologique VIH est inconnu peuvent être testées pendant le travail afin de déterminer si un traitement antiviral doit être initié. prévention de la transmission de la mère à l’enfant Dans un autre exemple, un patient index peut être testé après une exposition professionnelle, pour permettre une initiation rapide de la prophylaxie antirétrovirale à l’agent de santé exposé Dans des contextes de forte prévalence, tels que départements d’urgence, des tests rapides peuvent rendre les tests plus réalisables et générer des résultats assez rapidement pour influencer la gestion clinique Te sts récemment approuvés par la FDA Six tests rapides ont été approuvés par la FDA depuis, tous avec des sensibilités et des spécificités comparables à celles des EIA classiques. Tableau Quatre des tests sont utilisés avec des échantillons de sang total ou oral. dans des milieux non expérimentaux Deux tests nécessitent des échantillons de sérum ou de plasma et doivent être effectués dans un laboratoire. En décembre, trois des tests rapides avaient reçu des dérogations en vertu des modifications du CLIA CLIA – les tests renoncés doivent utiliser des échantillons non traités. fluide oral, et doit être suffisamment simple pour que le risque d’erreur soit négligeable. La réception d’une dérogation CLIA permet des tests sur le lieu de soins dans des environnements dépourvus de laboratoires dédiés. et nécessitent une confirmation avec un test supplémentaire Les tests rapides décrits ici sont répertoriés dans l’ordre d’approbation de la FDA

ead – min later Si des anticorps anti-VIH sont présents, ils se lient aux peptides dans l’emplacement d’essai, provoquant l’apparition d’une ligne rouge. Si l’échantillon était adéquat, une ligne rouge apparaît également lorsque l’IgG se lie au point de contrôle. L’emplacement de contrôle indique un test négatif valide Les lignes rouges aux emplacements de contrôle et de test indiquent un test positif positif Lorsqu’aucune ligne n’apparaît à l’emplacement de contrôle, le test est invalide et doit être répété Reveal G Rapid HIV-Antibody Test MedMira Laboratories nécessite un échantillon de sérum ou de plasma; la procédure -min implique plusieurs étapes pour ajouter l’échantillon, les réactifs et la solution tampon à la cartouche de test, après quoi le résultat du test est immédiatement lu. Ce test est classifié comme étant de complexité modérée sous CLIA et est généralement réalisé dans un laboratoire clinique sont interprétés de la même manière que ceux des autres tests rapides: une ligne de contrôle rouge indique un résultat de test négatif valide. La présence de la ligne de contrôle et d’un point rouge sur le lieu de test indique un résultat de test positif et positif. Gold Recombigen VIH Trinity Biotech a reçu une dérogation CLIA pour une utilisation avec des échantillons de sang total obtenus par le doigt ou la ponction veineuse et peut également être utilisé avec des échantillons de sérum ou de plasma. ou du plasma est ajouté au puits de l’échantillon sur le dispositif de test, suivi de gouttes de solution tampon. Les résultats du test sont également lus visuellement à partir de la bandelette réactive: une seule ligne rouge dans la zone de contrôle signifie un résultat de test valide et négatif; les lignes rouges indiquent un résultat de test positif et positif; et l’absence d’une ligne dans le lieu de contrôle signifie un test invalide Développé il y a ~ ans, le Multispot HIV- / HIV-Rapid Test Bio-Rad Laboratories a été largement utilisé à l’extérieur des États-Unis mais n’a pas été approuvé par la FDA plus complexe à réaliser que les autres tests rapides, Multispot est approuvé par la FDA pour distinguer les anticorps anti-VIH des anticorps anti-VIH. Le test est classifié comme étant de complexité modérée selon CLIA et nécessite des échantillons de sérum ou de plasma frais ou congelés. ~ Min à effectuer après la préparation de l’échantillon En présence d’anticorps, une coloration bleue apparaît à certains endroits de la membrane de la cartouche. Deux taches indiquent la présence d’anticorps anti-VIH; un troisième indique la présence d’anticorps anti-VIH; et un quatrième, le contrôle interne, détecte les IgG Approuvé par la FDA en mai, le test VIH / Stat-Pak Chembio Diagnostic Systems a reçu une dérogation CLIA en novembre pour une utilisation avec des échantillons de sang total obtenus par le doigt ou la ponction veineuse. Le test peut également être réalisé sur sérum ou plasma. Le spécimen, obtenu en utilisant une boucle -μL fournie avec le kit de test, est appliqué sur le puits d’échantillon sur la cartouche de test, suivi de gouttes de tampon Résultats valides, indiqués par la présence de rouge Le test a été renommé “Clearview HIV / Stat-Pak” en février Le système de diagnostic Sure Check HIV / Assay Chembio a été approuvé par la FDA pour détecter et détecter le VIH et le VIH. – Le fabricant a demandé une dérogation CLIA pour l’utilisation du test avec des prélèvements de sang total obtenus par piqûre ou ponction veineuse, mais le test peut également être réalisé avec du sérum ou du plasma. Le dispositif ressemble au cylindre d’une seringue contenant le test bande A -μL L’échantillon est obtenu par capillarité dans l’extrémité du cylindre, qui est ensuite insérée dans un flacon de solution de développement anti-inflammatoire non stéroïdien. Des résultats valides, également indiqués par la présence de lignes rouges sur la bande de test blanche, sont directement lus sur la bandelette. le test est initié de note, le test a été renommé “Clearview Complete HIV /” en février Confirmation et conseil des patients sur les résultats des tests Parce que les tests rapides ont des sensibilités et spécificités similaires à celles des EIA classiques, un résultat négatif est concluant et ne nécessite généralement pas de tests de suivi Cependant, comme les résultats de ces tests d’anticorps peuvent être négatifs avant la séroconversion, un individu ayant une éventuelle exposition au VIH doit être testé de nouveau en quelques mois. résultat avec un EIA conventionnel, nécessite des tests supplémentaires pour confirmer le diagnostic, généralement avec un transfert Western ou immunofluorescence indirecte Si la confirmation Le résultat du test est négatif ou indéterminé, des tests de suivi après mois sont recommandés, pour exclure les possibilités de confusion ou d’infection précoce qui ne sont pas encore détectables par Western blot Les personnes ayant des tests rapides réactifs Les conseils devraient inclure des informations sur l’infection et le traitement du VIH, des mesures qui peuvent être prises pour éviter la transmission potentielle du VIH en attendant les résultats des tests de confirmation, et des dispositions pour une évaluation et un traitement plus approfondis.

Tests RNA

Bien que les tests d’anticorps constituent le pilier du diagnostic VIH, les anticorps peuvent être indétectables au cours des premières semaines suivant l’infection. La détection de l’ARN peut jouer un rôle important dans l’identification des infections précoces avant séroconversion et dans la confirmation après tests réactifs. un test d’ARN avec sensibilité des copies / ml détecté infection par le VIH ~ semaine avant le test de l’antigène p et quelques jours avant un test d’anticorps de troisième génération sensible Les tests ARN NAAT ont été utilisés pour quantifier les charges de VIH Parce que les tests sont coûteux et techniquement complexes à réaliser, ils n’ont pas été adoptés comme outils de criblage répandus. Les nouvelles technologies et les stratégies de mutualisation peuvent changer cette situationPour compenser le coût des tests d’ARN, l’état de Caroline du Nord a adopté un algorithme de -des spécimens négatifs obtenus auprès de personnes ayant participé au counselling Programmes de tests Avec des tests groupés, les échantillons négatifs peuvent être testés avec un simple test d’ARN en créant des pools miniatures avec des échantillons chacun, puis en combinant les pools miniatures dans un pool principal pour le dépistage. spécimen, il est déconstruit pour déterminer lequel des pools miniatures avait ⩾ spécimen VIH-positif, et les échantillons de composants de ce pool miniature sont ensuite testés pour identifier les spécimens positifs Dans une étude des individus à haut risque dépistés avec des tests d’anticorps anti-VIH, En septembre, le test qualitatif Aptima HIV-RNA Gen-Probe a été le premier test d’ARN NAAT approuvé par la FDA pour les tests de dépistage des anticorps anti-VIH. diagnostic de l’infection par le VIH Ce test utilise une amplification médiée par la transcription, une technique de TAAN actuellement utilisée pour dépister des échantillons d’urine ou de prélèvements vaginaux contre l’infection à Chlamydia et g. onorrhée, pour détecter l’ARN du VIH dans le plasma L’ARN est capturé sur des microparticules magnétiques et ensuite amplifié pour la détection au moyen d’une sonde chimiluminescente. La procédure nécessite des échantillons de plasma, comprend plusieurs étapes manuelles. est approuvé comme aide au diagnostic de l’infection par le VIH, y compris l’infection aiguë chez les patients sans anticorps anti-VIH, et comme test complémentaire, lorsqu’il est réactif, pour confirmer l’infection par le VIH chez un individu dont le spécimen est réactif aux anticorps anti-VIH. % -% des personnes gravement infectées par le VIH manifesteront des symptômes d’infection rétrovirale aiguë, tels que fièvre, lymphadénopathie, pharyngite et éruption cutanée Pour les patients qui présentent un syndrome clinique compatible et qui signalent un comportement à haut risque récent devrait envisager un diagnostic d’infection aiguë par le VIH Dans ces situations, des tests pour l’ARN du VIH plasmatique et l’anticorps anti-VIH devraient être effectués Acu L’infection par le VIH est définie par des taux détectables d’ARN du VIH dans le plasma provenant de patients présentant des résultats négatifs ou indéterminés de tests d’anticorps anti-VIH. Les dosages quantitatifs de charge virale ARN ont été utilisés pour le diagnostic d’infection VIH aiguë. diagnostic d’infection par le VIH Un taux d’ARN VIH faiblement positif, soit & lt ;, copies / mL, peut représenter un résultat de test faussement positif, car les taux d’ARN lors d’une infection aiguë sont généralement très élevés, par exemple, & gt; L’infection par le VIH diagnostiquée sur la base d’un test d’ARN VIH doit faire l’objet d’un test sérologique à un moment ultérieur pour confirmer la survenue d’une séroconversion

Conclusion

Pendant des années, les EIA de première et de deuxième génération, avec le Western blot comme test de confirmation, ont constitué la norme d’excellence pour le dépistage du VIH aux États-Unis. La disponibilité de plusieurs tests rapides, précis, faciles à utiliser et rentables Les tests de dépistage des anticorps anti-VIH joueront un rôle essentiel dans l’initiative du CDC pour encourager le dépistage du VIH plus répandu. Comme de nombreux tests de dépistage plus récents permettent maintenant d’identifier les personnes infectées par le VIH plus tôt que le Western blot, un nouvel algorithme sera utilisé. Les dosages d’ARN pourraient jouer un rôle important dans la confirmation, mais ce rôle n’a pas encore été établi car ils peuvent aussi donner des résultats erronés. Les développements qui rendent les tests d’ARN plus rentables pourraient aider à identifier les personnes infectées par le VIH. plus tôt au cours de l’infection, mais cette nouvelle génération de tests VIH doit être introduite de manière réfléchie Des considérations contextuelles sont nécessaires pour déterminer Les tests d’ARN peuvent détecter l’infection plus tôt, mais ils offrent peu d’avantages si les résultats ne sont pas connus rapidement. Des tests rapides d’anticorps anti-VIH faciles à utiliser sont possibles dans divers lieux cliniques et non cliniques, mais l’assurance qualité doit être maintenue Les résultats presque immédiats obtenus avec certains des tests les plus récents signifient que des professionnels qualifiés doivent être disponibles pour aider les personnes infectées par le VIH à comprendre leur maladie et à impliquer le système de soins médicaux. l’arsenal thérapeutique pour nous aider à identifier le VIH, mais ce ne sont que des outils Le jugement clinique et la relation clinicien-patient sont essentiels à un dépistage réussi, à un diagnostic précis et à un suivi efficace

Remerciements

Les «Possibilités d’amélioration du diagnostic, de la prévention et du VIH» La conférence sur l’accès aux soins aux États-Unis a été parrainée par l’American Academy of HIV Medicine, l’amfAR, les centres de prévention et de contrôle des maladies, le forum de recherche collaborative sur le VIH, l’association de médecine du VIH de l’Infectious Diseases Society of America. Institut de l’allergie et des maladies infectieuses Le financement de la conférence a été fourni grâce à une subvention éducative sans restriction de Gilead Sciences, AmfAR, GlaxoSmithKline, Pfizer, Abbott virologie, OraSure Technologies, Roche Diagnostics et parrainage de Trinity BiotechSupplement. Cet article a été publié dans un supplément intitulé «Opportunités pour améliorer le diagnostic, la prévention et l’accès aux soins pour l’infection à VIH aux États-Unis», parrainé par l’American Academy of HIV Medicine, l’amfAR, les Centers for Disease Control et Prevention, le Forum for Collaborative HIV Research, l’Association de Médecine du VIH de la Société des Maladies Infectieuses d’Amérique et l’Institut National e de l’allergie et des maladies infectieuses Conflits d’intérêts potentiels BMB: no conflicts