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Acinetobacter baumannii résistant à la colistine: au-delà de la résistance au carbapénème

Contexte Avec une augmentation de l’utilisation de la colistine méthansulfonate CMS pour traiter les infections à Acinetobacter baumannii résistantes aux carbapénèmes, la résistance à la colistine est en émergence. Méthodes Les patients atteints d’une infection ou d’une colonisation due à une bactérie résistante à la colistine ont été identifiés dans un système hospitalier en Pennsylvanie. Des tests de susceptibilité, électrophorèse sur gel à champ pulsé PFGE, et typage multilocus MLST ont été réalisés. Pour étudier le mécanisme de la résistance à la colistine, le lipide A a été soumis à une spectrométrie de masse à désorption / ionisation assistée par matrice.Résultats Vingt patients présentant un Baumannii A résistant à la colistine La pneumonie associée à un ventilateur était le type d’infection le plus courant Dix-neuf patients avaient reçu un SGC par voie intraveineuse et / ou inhalée pour le traitement d’une infection à baumannii résistante au carbapénème et à la colistine avant l’identification des isolats résistants à la colistine. Le régime de traitement de l’infection à Baumannii résistante à la colistine associée au taux de mortalité le plus bas était une combinaison de CMS, un carbapénème et d’ampicilline-sulbactam. Les isolats résistants et résistants à la colistine des mêmes patients étaient fortement apparentés au PFGE, Par MLST, tous les isolats appartenaient au clone international II, la lignée qui est épidémique dans le monde entier. La modification du lipide A par la phosphoéthanolamine était présente dans tous les isolats d’A baumannii résistants à la colistine. Lipid Une modification par l’ajout de phosphoéthanolamine représentait la résistance à la colistine. Un test de sensibilité à la colistine devrait être envisagé pour A baumannii identifié à partir de la CMS xanthopsie. patients expérimentés

Acinetobacter baumannii, résistance au carbapénème, résistance à la colistine, typage moléculaire, lipide. Le commentaire éditorial de Pogue, Cohen et Marchaim sur les pages -Acinetobacter baumannii est un pathogène hospitalier majeur qui provoque un éventail de maladies, notamment les voies respiratoires, la circulation sanguine, les voies urinaires , site chirurgical, et infections des plaies Acinetobacter baumannii a tendance à acquérir une résistance à plusieurs classes d’agents antimicrobiens, et le traitement de l’infection par des souches hautement résistantes peut être extrêmement difficile Pour cette raison, l’Infectious Diseases inclus A baumannii parmi les agents pathogènes résistants aux antimicrobiens responsables d’une morbidité et d’une mortalité élevées chez les patients Augmentation des infections dues à la MDR multirésistante Des souches de baumannii résistantes à au moins différentes classes d’agents antimicrobiens ont été signalées au cours des dernières décennies [, Les carbapénèmes ont été considérés comme des agents appropriés pour traiter les infections ns due à MDR A baumannii souches Cependant, une augmentation mondiale de la résistance au carbapénème a été observée récemment, principalement due à la propagation de plusieurs clones internationaux Aux États-Unis, les taux de résistance au carbapénème parmi les souches cliniques A baumannii gamme de% à% Thérapie de la résistance au carbapénème Une infection de baumannii nécessite souvent l’utilisation du méthansulfonate de colistine CMS est administré par voie intraveineuse comme un promédicament inactif, qui est converti dans le sang en sulfate actif de colistine Plus récemment, cependant, une étude de surveillance des hôpitaux américains a révélé que% de toutes les souches d’Acinetobacter étaient résistantes à la colistine Malgré l’ampleur potentielle du problème, les données concernant la clinique, Les caractéristiques microbiologiques et moléculaires des infections à A. baumannii résistantes à la colistine restent rares à ce jour. Les objectifs de la présente étude e évaluer les caractéristiques cliniques et les résultats des patients atteints d’infections dues à des baumanii résistants à la colistine, déterminer l’épidémiologie moléculaire des souches et élucider le mécanisme sous-jacent à la résistance à la colistine chez les souches de baumannii

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Patients et isolats bactériens

Les patients colonisés ou infectés avec A baumannii résistant à la colistine ont été identifiés à l’Université de Pittsburgh Medical Center entre et Colistin tests de sensibilité a été réalisée à la demande du médecin traitant par macrodilution de bouillon Colistin concentrations inhibitrices minimales MICs & gt; Les isolats résistants à la colistine et les isolats antérieurement sensibles à la colistine provenant des mêmes patients ont été recueillis par le laboratoire de microbiologie clinique. L’étude a été approuvée par le comité d’examen institutionnel de l’Université de Pittsburgh PRO.

Donnée clinique

Données démographiques des patients, conditions médicales sous-jacentes, types d’infection, agents antimicrobiens administrés avant et après isolement des isolats de A baumannii résistants à la colistine, admission en unité de soins intensifs, évaluation de la physiologie aiguë et de la santé chronique APACHE II au moment de l’identification Les types de l’infection ont été définis selon les définitions normalisées par les Centers for Disease Control et Prevention / National Healthcare Safety Network Pour la pneumonie, le Pneumonie PNU avec des résultats de laboratoire spécifiques et Pneumonie PNU dans les catégories de patients immunodéprimés ont été appliqués selon le cas Les patients qui n’ont pas reçu de traitement spécifique pour A baumannii ont été considérés comme colonisés seulement réponse clinique au traitement a été classée comme succès pour les patients l’infectio Pour la pneumonie, l’amélioration de l’hypoxémie, la leucocytose, la fièvre et la réduction des sécrétions a été considérée comme un succès Pour la bactériémie, la résolution des symptômes et l’élimination du sang cultures définies succès Les dossiers hospitaliers et l’indice de décès de la sécurité sociale ont été évalués pour déterminer la mortalité au jour suivant l’apparition de l’infection de A. baumannii résistante à la colistine. La mort a été attribuée à l’infection lorsque le patient était infecté au moment du décès.

Test de sensibilité

Les MIC de la tigécycline et de la minocycline ont été déterminées par Etest bioMérieux, Durham, Caroline du Nord Les CMI d’autres agents antimicrobiens ont été déterminées par microdilution en bouillon à l’aide de plaques Sensititre GNXF TREK Diagnostic Systems, Oakwood Village, Ohio Résultats ont été interprétés selon les seuils de sensibilité de l’Institut de normalisation clinique et de laboratoire Les CIM de tigécycline ont été interprétées à l’aide des seuils de tolérance pour les entérobactéries définies par la Food and Drug Administration des États-Unis.

Electrophorèse sur gel à champ pulsé et dactylographie multilocus

La parenté génétique des isolats résistants et résistants à la colistine des mêmes patients a été déterminée par électrophorèse en champ pulsé PFGE en utilisant un système CHEF DR III Bio-Rad, Hercules, Californie en utilisant l’enzyme de restriction ApaI et interprété selon les critères proposés par Tenover et al La parenté génétique parmi les isolats résistants à la colistine de tous les patients a été évaluée par la méthode des groupes de paires non pondérées en utilisant la version Bionumerics Applied Maths, Austin, Texas Pour déterminer les lignées clonales, les types de séquence ST de la colistine isolats résistants ont été déterminés par typage multilocus MLST

Détection de gènes codant pour la carbapénémase

La détection du gène intrinsèque de la carbapénémase de type blaOXA a été réalisée par amplification en chaîne par polymérase PCR en utilisant des ensembles d ‘amorces et des conditions décrites précédemment Une PCR multiplex a été réalisée pour détecter les gènes blaOXA, blaOXA et blaOXA. gènes de la carbapénémase

Analyse du lipide A

Le lipide A a été extrait à l’aide d’un procédé à base d’hydroxyde d’ammonium / acide isobutyrique Une fois extrait, le μL du concentré a été déposé sur une plaque MALDI-TOF de désorption / ionisation-temps de vol assistée par matrice suivie de μL de matrice norharmane Sigma- Aldrich, St Louis, Missouri, puis séchés à l’air Les échantillons ont été analysés sur un spectromètre de masse Bruker AutoFlex Bruker Daltonics, Billerica, Massachusetts en mode ions négatifs

RÉSULTATS

Vingt cas uniques d’A baumannii résistants à la colistine ont été identifiés. Dix-neuf d’entre eux présentaient des isolats de A baumannii sensibles à la colistine identifiés avant le début de la résistance à la colistine et les isolats sensibles étaient disponibles pour une analyse ultérieure chez les patients. A baumannii résistant à la colistine Pris ensemble, isolent des paires d’isolats résistants à la colistine et sensibles, et des isolats résistants à la colistine sans isolats sensibles accompagnés étaient disponibles pour l’analyse

Caractéristiques cliniques des patients atteints d’infections à baumannii résistant à la colistine

Les caractéristiques cliniques et les résultats de tous les patients sont résumés dans le tableau. Dans l’ensemble, les patients étaient gravement malades avec un score médian de APACHE II, et tous les patients sauf un étaient en réanimation au moment de l’isolement de A baumannii résistant à la colistine. Les types d’infection comprenaient la pneumonie sous ventilation assistée VAP [%], la bactériémie [%], la médiastinite [%] et la pneumonie nosocomiale [%] La source de bactériémie était présumée être la PAV chez les patients. Tous les patients initialement infectés par la colistine sensible baumannii a reçu un traitement par CMS intraveineux, CMS inhalé, ou les deux, avant l’isolement de A baumannii résistant à la colistine; % ont reçu un traitement par CMS intraveineux pendant une durée médiane de plusieurs jours, – et% ont reçu un traitement par CMS inhalé pendant une durée médiane de plusieurs jours, – L’intervalle médian entre l’isolement de l’isolat de baumannii sensible à la colistine et le Un isolat de baumannii résistant était de portée de jours, –

rhose BAL VAP Oui CMS, DOR Echec Non … … M Transplantation pulmonaire Colonisation des expectorations Oui Aucune … Non … Non M Transplantation cardiaque et pulmonaire Expectorations HAP Non CMS, DOR, AMS Succès Non … Oui F Transplantation hépatique BAL VAP Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non M Transplantation pulmonaire Lavage bronchique VAP Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non M Transplantation pulmonaire Lavage bronchique VAP Oui Aucune CMS inhalée seulement, DOR Succès Non … Non F Retard mental, Maladie de Parkinson BAL VAP Oui CMS, DOR Echec Oui Oui … F CVA BAL VAP Oui CMS, DOR Echec Oui Oui … M CVA BAL Colonisation Oui Aucune Aucune … Non … Non M Transplantation pulmonaire Colonisation des expectorations Oui Aucune … Non … Non F Transplantation pulmonaire BAL VAP Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non F Nécrolyse épidermique toxique Liquide pleural VAP Oui CMS, MEM Su ccess Non … Non M Transplantation pulmonaire Bactériémie Oui Nonec Nonec CMS, DOR, AMS Succès Non … Non M MPOC, carcinome amygdalien Bactériémie sanguine Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non Patient Âge Sexe Maladies sous-jacentes Genre de culture Type d’infection USI APACHE Score II antérieur par voie intraveineuse CMS, antérieurement inhalé CMS, da Traitement de l’infection résistante à la colistine Réponse clinique -d Mortalité attribuable à l’infection d Récurrence F Transplantation pulmonaire Expectorat PAV Oui CMS, TIG, AMS Échec Oui Oui … M Transplantation cardiaque Fluide médiastinal Médiastinite Oui Aucune CMS, TIG Echec Oui Oui … M Transplantation pulmonaire BAL VAP Oui AMS, TIG, RIF Echec Oui Nob … M Transplantation rénale Sputum PAV Oui Aucune CMS, DOR, AMS Succès Non … Non F Démence, pneumonie récidivante Aspiration trachéale VAP Oui CMS , DOR Succès Non … Oui F CVA BAL VAP Oui A MS Echec Oui Nob … M Obésité morbide, cirrhose du foie BAL VAP Oui CMS, DOR Echec Non … … M Transplantation pulmonaire Colonisation des expectorations Oui Aucune … Non … Non M Transplantation cardiaque et pulmonaire Expectorations HAP Non CMS, DOR, AMS Succès Non … Oui F Greffe de foie BAL VAP Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non M Transplantation pulmonaire Lavage bronchique VAP Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non M Transplantation pulmonaire Lavage bronchique VAP Oui Aucune CMS inhalée seulement, DOR Succès Non … Non F Retard mental , Maladie de Parkinson BAL VAP Oui CMS, DOR Echec Oui Oui … F CVA BAL VAP Oui CMS, DOR Echec Oui Oui … M CVA BAL Colonisation Oui Aucune Aucune … Non … Non M Transplantation pulmonaire Colonisation des expectorations Oui Aucune … Non … Non F Transplantation pulmonaire BAL VAP Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non F Epide toxique nécrolyse rénale Liqueur pleurale VAP Oui CMS, MEM Réussite Non … Non M Transplantation pulmonaire Sang Bactériémie Oui Nonec Nonec CMS, DOR, AMS Succès Non … Non M MPOC, carcinome amygdalien Sang Bactériémie Oui CMS, DOR, AMS Succès Non … Non Abréviations: AMS l’ampicilline-sulbactame; APACHE II, Physiologie aiguë et évaluation de la santé chronique II; BAL, spécimen de lavage broncho-alvéolaire; CMS, méthansulfonate de colistine; MPOC, maladie pulmonaire obstructive chronique; CVA, accident vasculaire cérébral; DOR, doripénème; F, femme; PAH, pneumonie nosocomiale; Unité de soins intensifs, unité de soins intensifs; M, mâle; MEM, méropénème; RIF, rifampicine; TIG, tigécycline; VAP, pneumonie associée au ventilateur Jours de traitement entre l’isolement d’isolats sensibles à la colistine et résistants à la colistineb L’événement d’aspiration subséquent et l’ischémie intestinale ont été jugés être les causes de leur décès, respectivement. Le patient n’avait pas d’isolat antérieur sensible à la colistine. Les patients ont été traités pour des infections à A baumannii résistantes à la colistine, alors que les patients étaient asymptomatiques, n’ont pas reçu de traitement contre A baumannii résistant à la colistine et ont été classés comme Colonisation Tous les patients colonisés avaient reçu un CMS pour des infections antérieures dues à A baumannii sensible à la colistine. Plus précisément, le premier patient a achevé le traitement de la PVA par A baumannii sensible à la colistine, et au moment de la détection de A baumannii résistant à la colistine. caractéristiques cliniques et radiographiques Le deuxième patient avait une muqueuse g Un événement qui s’est amélioré avec la bronchoscopie, et qui manquait par ailleurs de signes d’infection au moment de la culture. Le dernier patient présentait un A baumannii résistant à la colistine isolé d’une culture d’expectoration en l’absence de tout signe ou symptôme d’infection. -résistant A baumannii infections, reçu divers schémas d’association CMS-based Le régime le plus commun était une combinaison de CMS, un carbapenem, et ampicillin-sulbactam n = Aucun de ces patients est mort dans les jours de l’infection, par rapport à% de patients qui ont reçu autres schémas antimicrobiens P = par test exact de Fisher La mortalité toutes causes confondues était de% / jours Les décès étaient probablement attribuables à l’infection à A baumannii Deux patients avaient une récidive d’infection en quelques jours Ils étaient tous deux traités avec une combinaison de CMS et un carbapénème au moment de la récurrence; le patient a survécu et est décédé pendant le séjour à l’hôpital

Susceptibilité aux antimicrobiens et gènes codant pour la carbapénémase

Les CMI des isolats de Baumannii résistants à la colistine sont indiqués dans le tableau. Tous les isolats étaient non sensibles à la pipéracilline-tazobactam, à la gentamicine, à l’imipénème, au méropénem, ​​au doripénème et à la ciprofloxacine. La plupart des isolats étaient non sensibles au triméthoprime-sulfaméthoxazole. ampicilline-sulbactam% Cinquante pour cent et% étaient non sensibles à la minocycline et à la tigécycline, respectivement

Tableau Susceptibilité Antimicrobienne et Types Moléculaires d’Isolats de Acinetobacter baumannii résistants à la Colistine Type de Patient Type OXA Carbapénémase MIC, pg / ml pEtNa CST AMS PTZ AMK GEN TOB CIP TMP-SMX IPM MEM DOR MIN TIG-like, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -like, ≤ / & gt; / ≤ & gt; ≤ & gt; & gt; / & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / / & Gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / -like, / & gt; / ≤ & gt; ≤ & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -like, ≤ / / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, / & gt; / ≤ & gt; ≤ & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; ≤ / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; Type de séquence patient OXA carbapénémase MIC, μg / mL pEtNa CST AMS PTZ AMK GEN TOB CIP TMP-SMX IPM MEM DOR MIN TIG-like, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -like, ≤ / & gt; / ≤ & gt; ≤ & gt; & gt; / & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / / & Gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / -like, / & gt; / ≤ & gt; ≤ & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; & gt; -like, ≤ / / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, / & gt; / ≤ & gt; ≤ & gt; & gt; / & gt; & gt; -comme, / & gt; / & gt; ≤ / & gt; & gt; & gt; -comme, & gt; / & Gt; / & gt; & gt; & gt; & gt; & gt; / & gt; & gt; Les CMI de la colistine ont été obtenues avec la méthode de dilution en gélose et les CMI de la minocycline et de la tigécycline ont été obtenues avec Etest Les CMI des autres CMI ont été obtenues avec la méthode de microdilution en bouillon dans les fourchettes sensibles selon les critères du Clinical and Laboratory Standards Institute: AMK, amikacine ; AMS, ampicilline-sulbactam; CIP, ciprofloxacine; CST, colistine; DOR, doripénème; GEN, gentamicine; IPM, imipénème; MEM, méropénème; CMI, concentrations inhibitrices minimales; MIN, minocycline; OXA, oxacillinase; pEtN, phosphoéthanolamine; PTZ, pipéracilline-tazobactam; TIG, tigécycline; TMP-SMX, triméthoprime-sulfaméthoxazole; TOB, tobramycine Absent dans le lipide A de tous les isolats sensibles à la colistine correspondants. Large Parmi les isolats de A baumannii sensibles à la colistine, tous étaient non sensibles au méropénem et au doripénème, et tous étaient sauf non sensibles à l’imipénem. Tableau supplémentaire Ils étaient nominalement plus résistants à l’ampicilline-sulbactam En dehors de ces agents, aucune différence n’a été observée dans les CMI entre les isolats sensibles à la colistine et les isolats résistants à la colistine. Tous les isolats de baumannii résistants à la colistine et sensibles à la colistine étaient positifs pour le blaOXA- -comme le gène intrinsèque de la carbapénémase dans A baumannii De plus, tous les isolats étaient positifs à la PCR multiplex blaOXA, ce qui explique la résistance au carbapénème Aucun des isolats n’était positif pour les gènes blaOXA- et blaOXA-

Typage moléculaire

Au sein des paires d’isolats sensibles et résistants à la colistine provenant des mêmes patients, des paires partageant des profils de restriction indistincts, des différences de bande, des paires étaient dans une différence de bande considérée comme étroitement apparentée, et des paires avaient des différences de bande et de bande considérées. En comparaison avec le haut niveau de parenté observé entre les isolats sensibles et résistants des mêmes patients, il y avait une variabilité interpatient considérable des profils de restriction.

Figure Vue largeTélécharger diapositive Electrophorèse en champ pulsé dendrogramme des isolats d’Acinetobacter baumannii résistants à la colistine des patients Les isolats ont été regroupés en grappes avec une valeur de coupure de%, démontrant une grande diversitéFigure View largeTélécharger diapositive Electrophorèse en champ pulsé dendrogramme des isolats d’Acinetobacter baumannii résistants à la colistine Les isolats ont été groupés en grappes avec un seuil de%, démontrant une diversité substantielle. Par MLST,, et les isolats appartenaient à ST, ST et ST, respectivement. Tous ces ST appartiennent au complexe clonal CC; CC par le protocole alternatif MLST proposé par Diancourt et al , qui correspond à une partie du clone international II et est couramment observé chez les baumannii A résistants aux carbapénèmes dans les hôpitaux du monde entier

Profils lipidiques A d’isolats résistants à la colistine et sensibles

Pour déterminer la présence ou l’absence de cette modification lipidique A, la spectrométrie de masse MALDI-TOF a été réalisée sur tous les isolats résistants à la colistine et à la colistine. Le lipide A des isolats résistants à la colistine présentait généralement des ions [MH] – L’ion le plus proéminent à m / z correspond à un lipide hepta-acylé bisphosphorylé A L’ion à m / z correspond au lipide hepta-acylé A m / z modifié par l’addition de phosphoéthanolamine m / z était présent dans tous les isolats L’ion à m / z était présent dans tous les isolats résistants à la colistine, mais dans aucun des isolats sensibles à la colistine.

Figure Vue largeTélécharger la diapositive Comparaison de l’analyse de désorption / ionisation-temps de vol assistée par matrice du lipide A isolée d’isolats d’Acinetobacter baumannii sensibles et résistants à la colistine du patient Le lipide A isolé de souches résistantes à la colistine a produit un pic ionique -Rapport m / z de la spectrométrie de masse flèche en gras qui correspond au lipide modifié A avec l’ajout d’un groupe phosphoéthanolamine Les flèches fines révèlent un ion à m / z qui correspond au lipide hepta-acylé bisphosphorylé A de A baumanniiFigure View largeTélécharger DiapositiveComparaison de désorption / ionisation laser assistée par matrice – analyse du temps de vol du lipide A isolé des isolats d’Acinetobacter baumannii sensibles et résistants à la colistine du patient Le lipide A isolé des souches résistantes à la colistine a produit un pic ionique à un rapport masse / charge m / z de la spectrométrie de masse flèche en gras qui correspond au lipide A modifié avec l’ajout d’un groupe phosphoéthanolamine Les flèches minces révèlent un ion à m / z correspondant au lipide hepta-acylé bisphosphorylé A de A baumannii

DISCUSSION

En effet, tous les patients ont reçu un traitement par voie intraveineuse et / ou inhalée avant l’identification d’un isolat résistant à la colistine. Cette constatation est en accord avec un rapport récent d’A baumannii résistant à la colistine du système de santé militaire américain. et est soutenu par la parenté génétique des isolats sensibles et résistants à la colistine par PFGE. En outre, seules des paires de patients dans et respectivement résidant dans la même unité de soins intensifs pour des périodes de chevauchement dans notre étude. Patients restants Pris ensemble, nous supposons que la résistance à la colistine émerge principalement sous la pression sélective pendant le traitement CMS chez les patients individuels, plutôt que par la transmission de patient à patient à l’hôpital Identification de l’exposition antérieure CMS doit être considérée dans le choix du traitement approprié infection à baumannii Dans l’ensemble,% des patients sont décédés de plusieurs jours; cependant, les taux de mortalité étaient plus bas chez les patients recevant une combinaison de médicaments CMS, carbapénème et ampicilline-sulbactam par rapport à d’autres schémas thérapeutiques. Ces données confirment des données in vitro récentes démontrant une activité bactéricide rapide de l’association par A baumannii Ainsi, dans le traitement des patients ayant déjà été exposés à la CMS, des tests de sensibilité à la colistine devraient être envisagés pour guider le traitement efficace. En outre, les futures études devraient se concentrer sur la meilleure utilisation du CMS. Un baumannii dans les hôpitaux du monde entier est maintenant compris comme un processus hautement clonal, avec le clone international II étant le clone le plus répandu Dans le clone international II, CC, tel que défini par le protocole MLST original , a été montré ont une distribution mondiale Nous avons précédemment documenté la prédominance de CC parmi les isolats de Baumannii résistants aux carbapénèmes identi Dans notre étude, tous les isolats d’A baumannii résistants à la colistine appartenaient à CC. Nos résultats sur le développement de la résistance à la colistine sont pertinents pour les localisations où les isolats CC résistants aux carbapénèmes sont largement répandus. Enfin, l’analyse des lipides A a fourni un aperçu du mécanisme. de la colistine La colistine est un agent antimicrobien amphiphile cationique qui interagit avec le lipide A du lipopolysaccharide membranaire externe LPS, entraînant sa rupture et provoquant ainsi la mort cellulaire Modification de la membrane externe des lipopolysaccharides par addition de phosphoéthanolamine au lipide hepta-acylé Nous avons observé cette modification chez tous les isolats d’A baumannii résistants à la colistine, mais aucun des isolats sensibles à la colistine correspondants. Nos données renforcent la thèse selon laquelle la résistance à la colistine est un facteur majeur de résistance à la colistine. fortement associé à une modification lipidique par phosphoetha nolamine La résistance à la colistine chez A baumannii peut également être attribuée à la perte complète de LPS ; cependant, nous avons pu identifier l’espèce lipide A intrinsèque au lipide A hepta-acylé bisphosphorylé A baumannii dans tous les isolats résistants à la colistine. Néanmoins, les CMI de la colistine variaient de μg / mL à & gt; μg / mL, suggérant que la résistance est probablement multifactorielle, et d’autres facteurs ne peuvent être exclus sur la base de notre étudeNos données proviennent d’un seul centre aux États-Unis, donc les résultats peuvent ne pas être généralisables à d’autres établissements. sur tous les isolats de A baumannii; Ainsi, il est possible que certains cas d’A baumannii résistants à la colistine n’aient pas été identifiés. En outre, l’absence d’un groupe de comparaison avec les cas A baumannii sensibles à la colistine nous empêche de tirer des conclusions définitives sur les résultats cliniques. appartenait au clone international II et produisait de l’OXA-carbapénémase, une combinaison commune observée chez les baumannii résistants aux carbapénèmes dans le monde . Notre étude du mécanisme de résistance à la colistine se limitait aux profils lipidiques A, qui représentaient catégoriquement la résistance à la colistine. En conclusion, la bactérie A baumannii résistante à la colistine est apparue presque exclusivement chez les patients ayant reçu un traitement CMS pour une infection à baumannii résistante au carbapénème et à la colistine. Un traitement associant CMS, un carbapénème et l’ampicilline-sulbactam a été associé à mortalité plus faible en comparaison avec d’autres régimes de traitement dans ce stud Cependant, le nombre de cas était faible et ce signal nécessite une confirmation dans une étude plus large. Tous les isolats appartenaient au clone international épidémique global II et la modification du lipide A était le mécanisme sous-jacent à la résistance à la colistine dans tous les isolats. pour A baumannii identifié à partir de patients CMS-expérimentés

Remarques

Remerciements Nous remercions Diana Pakstis et Lloyd Clarke pour leur aide à la coordination réglementaire et la collecte de données cliniques, respectivement. Nous sommes également reconnaissants au personnel de microbiologie clinique du Centre Médical de l’Université de Pittsburgh pour leur aide dans la collecte des isolats de l’étude. les numéros de subvention NIH des National Institutes of Health RAI à YD et KLTR à RKSYD ont également été soutenus par numéro de subvention NIH RAIPotential conflits d’intérêts RKS a reçu un financement de recherche de Astellas Pharma et Merck & amp; Co pour des études non liées à ce travail R K E a reçu un financement de recherche de MedImmune pour une étude non liée à ce travail Y D a siégé à un conseil consultatif pour Shionogi Inc, consulté pour Melinta Therapeutics, et a reçu un financement de recherche de Merck & amp; Co pour une étude sans rapport avec ce travail Tous les autres auteurs ne signalent aucun conflit potentiel Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits potentiels de conflits d’intérêts que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués