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Immunoglobuline A en tant que marqueur sérologique de la circulation silencieuse du poliovirus dans une population vaccinée contre le poliovirus inactivé

L’immunoglobuline IgA spécifique du poliovirus A est détectée après infection par un virus de type sauvage ou vaccination par le VPO poliovirus oral atténué vivant mais pas après vaccination par le poliovirus inactivé IPV Nous avons examiné si la présence d’IgA dans le sérum pouvait être utilisée comme marqueur de la circulation du poliovirus. Chez les personnes séronégatives vaccinées par le VPO, la sensibilité de ce marqueur était de% -% Les résultats d’une sérosurveillance ont montré une séroprévalence élevée% -% d’IgA dans la population née avant l’introduction de la vaccination aux Pays-Bas, ce qui reflète exposition naturelle Le début du programme de vaccination correspondait à une réduction de la séroprévalence des IgA tant chez les groupes vaccinés que chez les groupes non vaccinés% -% La présence de personnes IgA-positives dans la population pourrait s’expliquer en grande partie par la survenue d’épisodes Circulation du poliovirus Nous proposons d’utiliser la détection d’IgA spécifiques du poliovirus comme outil de surveillance de la population vaccinée et non vaccinée par le VPI, pour faciliter le processus d’éradication du poliovirus

Pour que l’éradication du poliovirus réussisse, la circulation du poliovirus de type sauvage doit cesser complètement et cette absence doit être démontrée de manière convaincante. L’éradication mondiale ne peut être considérée comme terminée que lorsque plus aucun cas de poliomyélite causée par le poliovirus de type sauvage Le poliovirus ne circule plus dans les sous-populations vaccinées ou non vaccinées Après l’arrêt de la transmission des poliovirus de type sauvage, la circulation des souches dérivées du vaccin antipoliomyélitique oral atténué doit être documentée et doit cesser complètement avant de pouvoir conclure que le monde est vraiment Bien que le VPO et le vaccin antipoliomyélitique inactivé IPV soient très efficaces pour protéger les vaccinés contre la poliomyélite, il est important de reconnaître que la protection contre l’infection ou la réinfection après la vaccination est incomplète et reste possible chez environ un tiers des vaccinés. , les infections ne sont pas facilement détectées, car le vaccin Pour cette raison, le dépistage des cas de paralysie flasque aiguë dans une population vaccinée ne peut être utilisé comme seule méthode pour déterminer l’absence de circulation du poliovirus. Une des alternatives – le dépistage à grande échelle de la population vaccinée L’excrétion du poliovirus est à la fois intensive en travail et très insensible car l’excrétion du virus ne dure généralement que quelques semaines chez les receveurs de vaccins, ce qui rend les taux de détection faibles . ceux induits par l’infection par le virus sauvage Tous ces facteurs rendent très difficile la preuve que le poliovirus ne circule pas dans une population vaccinée. Des IgA spécifiques du poliovirus sont détectées dans la salive et le sérum après infection par le virus sauvage et vaccination par le VPO [, En revanche, la vaccination par IPV, administrée par voie intramusculaire, n’induit pas de réponse IgA muqueuse Des études ont détecté seulement des réponses d’IgA très faibles dans le plasma chez moins de la moitié des personnes précédemment vaccinées par le VPI après une vaccination de rappel du VPI. Ces réponses étaient de niveau inférieur et moins nombreuses que les réponses observées après vaccination par le VPO. virus de type sauvage La quasi-absence d’IgA spécifique au poliovirus après vaccination par le VPI peut permettre son utilisation comme marqueur pour surveiller la circulation du vaccin antipoliomyélitique ou de type sauvage dans les populations vaccinées par le VPI. Utilisé exclusivement Le programme de vaccination contre le VPI a été lancé, lorsque la vaccination était offerte à tous les nouveau-nés, et une campagne de rattrapage ciblant les cohortes nées en – a été organisée Le nombre de cas de poliomyélite a diminué presque immédiatement après la mise en œuvre du programme La couverture vaccinale a rapidement atteint des niveaux de & gt;% et est restée & gt;% au cours des dernières années Bien que la couverture vaccinale globale soit élevée, il y a des groupes qui refusent la vaccination pour des raisons religieuses Le principal groupe de ce type, l’église orthodoxe réformée, vit dans des municipalités situées dans une ceinture qui s’étend du sud-ouest au nord-est, zones à risque de vaccination locale faible. Les épidémies locales de poliomyélite, confinées à des villages isolés, sont survenues dans ces groupes non vaccinés entre et Ces épidémies ont été suivies par une épidémie de serotype de poliovirus et par une épidémie de sérotype, qui se sont propagées la zone à risque Le but de la présente étude était de tester si l’ELISA IgA antipoliomyélitique spécifique peut être utilisé comme un outil pour la détection de la circulation du poliovirus

Figure Vue largeTableau de téléchargementNombre de patients atteints de poliomyélite déclarés annuellement aux Pays-Bas, – Lignes verticales, période intermédiaire; Les enfants nés au cours de cette période ont été vaccinés rétrospectivement avec le vaccin antipoliomyélitique inactivé IPV en Figure Vue détailléeDownloadNombre de patients atteints de poliomyélite signalés annuellement aux Pays-Bas, – Lignes verticales, période intermédiaire; les enfants nés pendant cette période ont été vaccinés rétrospectivement avec le vaccin antipoliomyélitique inactivé

Sujets, matériaux et méthodes

Échantillons sériques Pour l’évaluation du test ELISA IgA spécifique au poliovirus comme outil de détection de la circulation du poliovirus, des échantillons de sérums ont été testés. Des échantillons sériques d’enfants de neuf ans vivant en dehors de la zone à risque ont été obtenus. tous ces enfants avaient des niveaux détectables et élevés d’anticorps neutralisants contre tous les sérotypes de poliovirus. Des échantillons de sérum ont été prélevés chez% des volontaires ayant des cas de polio notifiés lors d’une épidémie de poliovirus sérotype – échantillons sériques de personnes non vaccinées avec aucun anticorps décelable contre le sérotype poliovirus n = ou sérotype n = n’a été obtenu, et jours après une épreuve avec une dose unique de VPO monovalent avec sérotype ou sérotype, respectivement Chiron Behring Les doses de provocation étaient × TCID pour le sérotype et × TCID pour En outre, dans le groupe séronégatif sérologique, on a trouvé que les personnes étaient séronégatives. Dans le groupe séronégatif, on a trouvé que des personnes supplémentaires étaient séronégatives pour le sérotype, et que les personnes% étaient séronégatives pour le sérotype. La séronégativité pour tous les sérotypes était rare% du sérotype séronégatif La séroconversion aux IgA a été évaluée dans la population des Pays-Bas ayant des antécédents connus d’exposition au poliovirus. Les échantillons de sérum ont été prélevés sur un échantillon de sérotype. banque de sérums établie pour la recherche en santé publique par le biais d’une enquête transversale en – La population étudiée comprenait les personnes âgées de 15 ans qui étaient nées avant et après le début du programme de vaccination contre le poliovirus et résidaient dans la zone à risque. échantillons de sérum de la banque ont été testés: échantillons de sérum obtenus de personnes qui ont normalement accepté vac Des échantillons de sérum ont été obtenus à partir d’une enquête transversale similaire dans la province d’Utrecht, aux Pays-Bas. Tous les sujets de l’étude ou leurs parents ou tuteurs ont donné leur consentement éclairé à la participationPoliovirus IgA-ELISA spécifique Tous les échantillons de sérum ont été testés pour les IgA anti-poliovirus spécifiques, IgA, IgA et IgA totales par ELISA, comme décrit ailleurs En bref, les plaques de microtitration ont été recouvertes d’anticorps monoclonaux spécifiques au sérotype. bloquant avec du sérum de chèvre normal, les plaques ont été incubées avec du poliovirus inactivé au formaldéhyde Avant le test, les échantillons de sérum ont été inactivés min à ° C et appauvri en anticorps IgG avec Quik-Sep Isolab, selon les instructions du fabricant, pour prévenir les éventuels interisotypes. ont été ajoutés aux plaques à une dilution de: Sigma IgA-spécifique, IgA-spécifique, et spécifique IgA So uthern Biotechnology Associates des conjugués de phosphatase alcaline ont été utilisés pour déterminer l’IgA totale liée et la sous-classe d’IgA spécifique au poliovirus Des échantillons témoins positifs et négatifs ont été inclus dans tous les tests IgA Un échantillon de sérum était considéré comme positif pour IgA si la densité optique OD était supérieure au seuil Les échantillons de selles provenant de volontaires ont été obtenus quelques jours après la provocation avec le VPO monovalent et toutes les semaines par la suite jusqu’à plusieurs semaines après la provocation pour tester le poliovirus. Excrétion L’isolement du virus a été réalisé sur des cellules LB, comme décrit ailleurs Analyse des données Pour déterminer la sensibilité du test IgA, la maladie clinique ou l’isolement du virus vaccinal de l’échantillon de selles ont été utilisés comme preuve d’infection. la cohorte post-vaccinale, c’est-à-dire les sujets nés dans ou plus tard ; la cohorte de période intermédiaire, composée de sujets vaccinés lors d’une campagne de rattrapage, c’est-à-dire de sujets nés en -; et la cohorte de prévaccination, c.-à-d. les sujets nés avant le test A was ont été effectués pour déterminer l’importance de la différence de séroprévalence entre les groupes P & lt; était considéré comme significatif

Résultats

Patients infectés par le sérotype poliomyélitique Un total de sérums prélevés sur des patients atteints de poliomyélite signalés lors d’une épidémie de poliovirus a été testé pour la présence d’IgA spécifiques du poliovirus Tous ces patients avaient une IgA spécifique au sérotype détecté dans au moins un échantillon de sérum La cinétique de la réponse IgA chez les patients a été rapportée ailleurs et montre que les taux d’IgA sont au maximum entre et semaines après le début de la paralysie. Cinq mois après le début de la paralysie Chez les patients atteints de poliomyélite, la réponse IgA spécifique au sérotype du poliovirus était comprise dans les sous-classes IgA et IgA. Cependant, l’ELISA de la sous-classe IgA ne donnait que des valeurs faibles de DO, indétectables pour tous les patients atteints de poliomyélite quelques semaines après le début de la paralysie.

Figure View largeTélécharger les valeurs de densité optique OD à nm déterminées par ELISA pour les sérotypes IgA, IgA et IgA à poliovirus chez les patients atteints de poliomyélite Les points relevés sont des médianes; les moustaches indiquent% et% quartiles Les résultats proviennent d’échantillons sériques consécutifs prélevés chez des patients au cours de l’épidémie – Pays-BasFigure View largeTélécharger Diapositives Densité optique DO à nm déterminée par ELISA pour IgA, IgA et IgA pour le sérotype poliovirus chez des patients atteints de poliomyélite les médianes; Les moustaches indiquent les% et les quartiles Les résultats proviennent d’échantillons sériques consécutifs prélevés chez des patients pendant l’épidémie aux Pays-Bas. Les volontaires non vaccinés avec un VPO monovalent Les pourcentages de personnes ayant des échantillons de selles testés positifs au poliovirus au moins une fois pendant le suivi étaient% de Le plus souvent, les échantillons de selles recueillis au cours des premières semaines après la provocation étaient positifs pour le poliovirus, avec un pic au jour après la provocation, lorsque% des sujets ont perdu le sérotype poliovirus et% des sujets ont perdu leur sérotype. Figure 8 Huit semaines après l’épreuve, aucun virus vaccinal sérotype n’a été isolé dans aucun des échantillons de selles, et seules des personnes ont perdu le virus du vaccin sérologique.

Figure Vue largeDownload slidePourcentage de sujets ayant des résultats positifs d’isolement de virus à partir d’échantillons de selles et pourcentage de sujets séropositifs pour les anticorps IgA contre le poliovirus sérotype A et sérotype B à différents moments après épreuve avec le vaccin poliovirus oral monovalent OPVFigure isolement du virus à partir des échantillons de selles et pourcentage de sujets séropositifs pour les anticorps IgA contre le poliovirus sérotype A et le sérotype B à différents moments après épreuve avec le vaccin poliovirus oral monovalent OPVAt au début de l’expérience, aucun des volontaires n’était séropositif pour l’IgA spécifique du poliovirus. après exposition au virus de provocation, seulement% des volontaires ont répondu avec des IgA spécifiques au poliovirus pour le sérotype, et% des volontaires ont répondu avec l’IgA pour le sérotype. Les taux d’IgA spécifiques du poliovirus ont atteint un pic quelques jours après la provocation. pour serotype et volun Le taux d’IgA pour le sérotype, mais ces proportions ont diminué à% de volontaires et% de volontaires, respectivement, au jour Figure Personnes acceptant la vaccination qui vivent dans les zones à risque Les séroprévalences les plus élevées pour tous les sérotypes ont été observées dans les cohortes de prévaccination:%,% % de volontaires pour les sérotypes, et, respectivement, figure A-C, tableau Séroprévalences d’IgA significativement plus faibles%,% et% pour les sérotypes, et, respectivement, ont été observés dans les cohortes post-vaccination Figure A: Tableau La plupart des personnes séropositives dans ce dernier groupe sont nés entre et pendant lesquels des épidémies locales de poliomyélite sont toujours survenues aux Pays-Bas. Les séroprévalences dans la cohorte de période intermédiaire ciblée par la campagne de rattrapage étaient de%,% et% pour les sérotypes, et respectivement Bien que plus faibles, ces taux de séroprévalence n’étaient pas significativement différents de ceux observés chez les personnes nées pendant la période de prévaccination

Figure View largeTélécharger les séroprévalences des anticorps IgA dirigés contre les sérotypes du poliovirus, et dans différents groupes d’âge dans le vaccin antipoliomyélitique inactivé vacciné contre la VPI A-C et la population non vaccinée D-F vivant dans la zone à risque aux Pays-Bas, – Arrow, start de la campagne de vaccination dans les lignes verticales, période intermédiaire; Les enfants nés au cours de cette période ont été vaccinés rétrospectivement contre le VPI, et dans différents groupes d’âge dans le vaccin antipoliomyélitique inactivé vacciné contre la VPI et la population non vaccinée D-F la zone à risque aux Pays-Bas, – Arrow, début de la campagne de vaccination dans les lignes verticales, période intermédiaire; les enfants nés durant cette période ont été vaccinés rétrospectivement

Tableau View largeTéléchargement de diapositives Taux d’IgA spécifiques aux poliovirus dans la population des Pays-Bas, -, selon l’année de naissanceTable View largeTélécharger les diapositives Taux d’IgA spécifiques aux poliovirus dans la population des Pays-Bas, – selon l’année de naissanceVaccin récemment vacciné contre l’IPV Enfants Aucun des enfants vaccinés par le VPI ne présentait d’anticorps IgA, IgA ou IgA détectables après la sixième vaccination contre le VPI. Seulement% des enfants étaient positifs pour l’IgA spécifique au sérotype,% pour l’IgA spécifique du sérotype et pour le sérotype spécifique Chiffre d’IgA Aucun des enfants n’a eu de résultats ELISA positifs pour le sérotype IgA, mais% avait un dosage d’IgA de sous-classe ou des résultats d’essai d’IgA de sous-classe positifs pour le sérotype

Figure Voir largeDownload Slidebox et moustaches parcelle de valeurs de DO de densité optique à nm déterminée par sérotype antipoliomyélitique -, – et spécifique de IgA et sous-classe IgA et IgA ELISA IgA Poliovirus spécifiques dans les échantillons de sérum obtenus auprès d’enfants âgés de neuf ans a été déterminée mois après leur sixième vaccination contre le vaccin antipoliomyélitique inactivé Lignes horizontales audacieuses, niveaux de coupure de l’ELISA IgA; boîtes,% et% quartiles; moustaches, rangesFigure Voir largeDownload Slidebox et moustaches parcelle de valeurs de DO de densité optique à nm déterminée par sérotype antipoliomyélitique -, – et spécifique de IgA et sous-classe IgA et IgA ELISA IgA Poliovirus spécifiques dans les échantillons de sérum obtenus à partir de neuf ans les enfants WAS mois déterminés après leur sixième vaccination contre le vaccin antipoliomyélitique inactivé Lignes horizontales audacieuses, niveaux de coupure du test ELISA IgA; boîtes,% et% quartiles; moustaches, gammes Population non vaccinée vivant dans la zone à risque Un total d’échantillons sériques de membres d’un groupe religieux ayant rejeté la vaccination et vivant dans la zone à risque ont été testés pour détecter la présence d’IgA spécifiques du poliovirus. sérotypes, et, respectivement dans la cohorte pré-vaccinale dans la sous-population qui a refusé la vaccination ne sont pas significativement différents des prévalences pour la cohorte correspondante dans la population générale qui a accepté le chiffre de vaccination, tableau A séroprévalence IgA significativement plus faible a été observée chez les personnes non vaccinés nés après la début de la-à-dire de la campagne de vaccination IPV, ou après, par rapport aux cohortes de prévaccinaux cependant, il y a clairement une séroprévalence IgA plus élevé dans le groupe non vacciné par rapport à la population vaccinée IPV dans la figure de la période post-vaccinales Cette différence observée était statistiquement significative pour IgA sérotypes et population générale du Nether terres Séroprévalences élevées% et% pour les sérotypes et, respectivement; sérotype non testé ont été observées dans les cohortes de prévaccinaux, et beaucoup plus faible séroprévalence% et% pour les sérotypes et, respectivement, ont été observées dans les cohortes après la vaccination, en particulier pour le sérotype figure IgA Dans les cohortes nées entre et, les deux sérotype et sérotype anticorps IgA ont été détectés

Figure Vue grandDownload slideSeroprevalence des anticorps IgA contre les sérotypes de poliovirus et, par année de naissance, dans la population générale des Pays-Bas Lignes verticales, période intermédiaire; Les enfants nés au cours de cette période ont été vaccinés rétrospectivement avec le vaccin antipoliomyélitique inactivé (IPV). les enfants nés pendant cette période ont été vaccinés rétrospectivement avec le vaccin antipoliomyélitique inactivé

Discussion

Les échantillons de sérum prélevés chez des personnes ayant été exposées au poliovirus à l’époque de la prévaccination avant, lorsque les infections à poliovirus étaient répandues, ont clairement montré un taux de positivité plus élevé pour les IgA spécifiques au poliovirus% -% -% table Une séroprévalence nettement plus faible des IgA pour tous les sérotypes a été observée après le début de la campagne de vaccination en Ce résultat coïncide avec la diminution simultanée du nombre de patients atteints de poliomyélite et confirme que la vaccination par IPV a significativement réduit la circulation sanguine. Ces résultats correspondent aux foyers documentés de poliomyélite confinés à des villages isolés dans des communautés non vaccinées Les effets positifs de la vaccination antipoliomyélitique ont été: pas l Les groupes non vaccinés ont également bénéficié de la campagne vaccinale, mais avaient des taux de séroprévalence significativement plus élevés que les IgA. Au cours de la période comprise entre et lorsque des foyers locaux ont été signalés, des anticorps de sérotype et de sérotype IgA ont été détectés dans ces cohortes. L’épidémie est probablement responsable des anticorps IgA spécifiques du sérotype observés chez les personnes nées entre – et celles qui étaient âgées de – l’âge de l’épidémie. Dans ces groupes, aucune induction d’IgA spécifique du sérotype n’a été observée au cours de la même période. spécificité du test ELISA IgA pour détecter la circulation virale. Le VPO trivalent a été distribué pour contrôler l’apparition de sérotypes de – Ceci pourrait expliquer l’induction d’IgA spécifiques du sérotype chez les personnes nées entre et, mais seulement quelques personnes nées durant cette période ont été trouvées positives. pour les anticorps du sérotype entre et Une personne née après l’éclosion du sérotype Nous proposons un programme de surveillance de l’absence de circulation du poliovirus sur la base de la séroprévalence des IgA spécifiques au poliovirus. Le meilleur groupe cible pour le suivi des la circulation du poliovirus sont de jeunes enfants nés après les derniers épisodes de circulation virale connus, ce qui permettrait de déterminer s’ils ont été exposés à une circulation silencieuse, mais la sensibilité exacte de l’ELISA IgA n’a jamais été déterminée dans ce groupe d’âge. informations importantes et essentielles pour calculer comment un système de surveillance des IgA doit être appliqué Nous prévoyons de nouvelles recherches pour remédier à cette lacune, tout en gardant à l’esprit la fenêtre de haute sensibilité du test IgA et en gardant à l’esprit que le dépistage des enfants vaccinés Pour avoir lieu régulièrement, nous avons calculé qu’un échantillon de ~ personnes est nécessaire pour détecter un agent infectieux arbitraire. sur taux de% Si tous les échantillons sont négatifs, la prévalence réelle est de & lt;% probabilité de Si un résultat positif pour ⩾ cas est détecté, c’est une indication que le poliovirus est ou était présent Pour estimer la prévalence réelle, un% IC pour Le groupe d’enfants nés après le dernier épisode connu de circulation du virus peut alors être calculé. La norme actuelle de l’OMS pour la surveillance de la circulation du poliovirus sauvage est la suivante: années Si aucune circulation du poliovirus n’est détectée durant cette période, un La région est déclarée exempte de poliomyélite Elle est basée sur la plus longue durée de circulation silencieuse des poliovirus. En conséquence, une période de surveillance après l’administration des dernières doses de VPO devrait être suffisante. Nous avons observé qu’une vaccination de rappel les sujets précédemment exposés aux muqueuses ont conduit à une forte induction d’IgA spécifiques du poliovirus dans la salive, mais la présence d’IgA dans la salive était, dans la plupart des cas, limitée. La détection d’IgA spécifiques du poliovirus dans les échantillons salivaires obtenus peu de temps après la vaccination systématique par IPV peut être très utile pour la détection de la circulation du poliovirus et peut augmenter la sensibilité d’un système de surveillance IgA En conclusion, l’ELISA IgA est un outil supplémentaire pour l’absence de circulation du poliovirus dans les populations vaccinées par IPV Nos résultats montrent clairement que la présence d’IgA spécifiques du poliovirus dans une population est corrélée à la présence d’infections à poliovirus dans la même population. L’isolement réel du virus reste la preuve ultime de la circulation du poliovirus, Pour cette raison, l’isolement du virus ne peut jamais être complètement remplacé par la détection d’IgA spécifiques du poliovirus. Cependant, il s’agit de la première méthode actuellement disponible pour étudier la circulation du virus à grande échelle chez les vaccinés et contribuer à la surveillance. de l’éradication du poliovirus dans une population vaccinée par le VPI dans un manière t-efficace

Remerciements

Nous reconnaissons grandement l’aide du Dr H C Rümke pour nous avoir fourni des échantillons de sérum obtenus d’enfants récemment vaccinés avec IPV