Responsabile: Stefano Amici Tel.: 071740324 - 3331140521
Via Malviano, 6
Monte San Vito - Cod. Fisc. e P. IVA 01570990422
Scrivici a: ladamigiana_1@libero.it


Home >> Transmission zoonotique de deux nouvelles souches de virus T-lymphotrope humain chez des chasseurs mordus par un gorille en Afrique centrale

Transmission zoonotique de deux nouvelles souches de virus T-lymphotrope humain chez des chasseurs mordus par un gorille en Afrique centrale

Le dépistage moléculaire des personnes à risque d’Afrique centrale a identifié le virus T-lymphotrope humain. Personnes infectées par le HTLV Une origine zoonotique de l’infection a été suggérée, les deux individus ayant été sévèrement mordus par un gorille lors des activités de chasse. comme le prototype HTLV-sous-type-b

HTLV-, gorille, zoonose, émergence, Afrique centrale Virus T-lymphotropes primitifs PTLV, y compris virus T-lymphotrope humain HTLV- / virus T-lymphotrope simien STLV-, HTLV- / STLV-, HTLV- / STLV-, et HTLV- / STLV-, constituent un groupe de rétrovirus humains et simiens apparentés qui partagent des caractéristiques épidémiologiques, biologiques et moléculaires communes. HTLV- et HTLV- sont relativement répandus, infectant des millions de personnes dans le monde. En revanche, le HTLV- n’a été observé que chez quelques individus africains. vivant en contact étroit avec des primates non humains infectés et le HTLV a été identifié chez une personne vivant uniquement au Sud Cameroun Alors que le sous-type cosmopolite HTLV est transmis par contact sexuel, transfusion sanguine et allaitement, sous-types africains du HTLV b, d, e, f, g, en particulier les souches HTLV, sont probablement aussi acquises par transmission interspécifique à partir de PSN infectés par des virus STLV et / ou STLV- Nous avons montré qu’une morsure grave par un PSN est un facteur de risque majeur pour le HTLV – infection au Cameroun, en Afrique centrale Les seules personnes infectées par le HTLV ont signalé des contacts avec divers PSN, y compris les gorilles, suggérant une acquisition virale par exposition aux liquides corporels des PSN au Cameroun L’origine du HTLV est restée inconnue jusqu’à un rapport récent de la présence. des souches de gorilles virales étaient étroitement apparentées à la souche prototypique humaine, avec plus de% d’identité nucléotidique HTLV – peut avoir ainsi émergé d’un réservoir de gorilles pour obtenir un meilleure compréhension de l’origine zoonotique possible du HTLV – et de sa distribution et de sa diversité génétique, nous avons examiné les séries disponibles de gorilles et d’individus hautement exposés du Cameroun et du Gabon par des méthodes moléculaires pour l’infection par le PTLV

Méthodes

Nous avons criblé une série de gorilles d’origine sauvage et sauvage capturés au Cameroun, originaires du Gabon, pour une infection par le PTLV dans le cadre des études en cours sur l’émergence rétrovirale en Afrique centrale Des prélèvements sanguins ont été réalisés selon les règles de l’animal. Nous avons également inclus des humains dans l’étude qui avaient déjà été mordus par des PSN, y compris par un gorille, un chimpanzé et un petit singe. Des échantillons humains avaient déjà été testés pour l’infection par le virus spumeux simien SFV et HTLV mais jamais parmi les Pygmées des tribus Baka ou Bakola et étaient des Bantous de différents groupes vivant dans la forêt méridionale du Cameroun ou dans les zones rurales du Gabon. Il y avait des mâles et des femelles avec un âge moyen de Le Comité National d’Ethique au Cameroun, le Ministère de la Santé et le Comité d’Ethique du Centre International de Recherches Médicales de Franceville au Gabon et le Comité de otection des Personnes et la Commission Nationale de l’Informatique et des Libertés en France ont approuvé l’étude. Tous les individus ont fourni un consentement éclairé écrit. Des échantillons d’ADN de buffy-coat sanguin périphérique ont été soumis à une réaction en chaîne par polymérase β-globine PCR pour assurer la qualité de l’ADN. de PTLV- utilisant des PCR nichées spécifiques ciblant une LTR terminale longue de -bp et une région pol -bp, respectivement Tableau supplémentaire L’ADN synthétique correspondant à la séquence HTLV-_CamLE a été utilisé comme témoin positif et a permis l’estimation de la sensibilité de la PCR. Copie en ng d ‘ADN Une PCR – imbriquée spécifique au PTLV – a été réalisée sur des échantillons de gorilles et ceux d’ humains mordus par un gorille Tableau supplémentaire Une PCR générique additionnelle PTLV – bp a été réalisée sur tous les gorilles. et des échantillons humains positifs Tableau supplémentaire Des échantillons de plasma humain ont été testés avec un test Western blot WB HTLV blot; MP Diagnostics et un immunodosage en ligne INNO-LIA HTLVI / II Score; Innogenetics

RÉSULTATS

Parmi les échantillons d’ADN de gorilles criblés de polynucléotides, de LTR, de taxons et de PCR génériques spécifiques au PTLV, on a trouvé des résultats positifs: LTR, pol et tax, et l’autre pour tous les PCR. les échantillons correspondaient aux mêmes gorilles de Benito et de Nyum identifiés dans une étude antérieure mais échantillonnés des années plus tôt Les animaux captifs étaient déjà infectés Les séquences montraient% nt identité avec celles précédemment publiées Un autre gorille, Mvie, était positif pour env PCR et s’est avéré être infecté par STLV-sous-type b HTLV-bp env PCR; GenBank KUThe dépistage des échantillons d’ADN humain identifié des échantillons positifs qui provenaient de chasseurs GabL et GabL mordu par un gorille lors d’activités de chasse au Gabon GabL était positif pour la pol et la PCR d’impôt; GabL était également positif pour la PCR RLT Les deux échantillons étaient également positifs pour l’environnement générique. PCRGabL est un homme âgé d’un an vivant dans la région d’Ogooué-Ivindo. Il a signalé une morsure sévère au bras par un gorille et a été échantillonné dans des études antérieures. montré qu’il était également infecté par gorilla SFV GenBank HQ Env PCR générique amplifié une séquence HTLV-séquençage d’une plus grande région HTLV-env a démontré que GabL a également été infecté par une souche HTLV sous-type b GenBank KU GabL exposé classique HTLV- sérologie avec une faible réactivité à HTLV-gp Figure A et B L’analyse des séquences des produits GabL HTLV-PCR a montré plus de% nt d’identité avec les séquences PTLV connues GenBank LTR KU, KU taxonomique L’analyse phylogénétique de la région fiscale -bp a confirmé la proximité de HTLV- GabL avec les seules souches HTLV-CAMLE et STLV- connues précédemment Figure C

Figure Vue en grandDisque Diagrammes sérologiques des individus infectés par le virus T-lymphotrope humain de type T-lymphotrope A et B et analyses phylogénétiques des souches C et D A et B, analyse par transfert de Western A; Tache HTLV,; Diagnostic MP et immunodosage en ligne B; Score INNO-LIA HTLV I / II; Innogenetics Lane, contrôle HTLV positif; voie, contrôle HTLV positif; voie, contrôle positif HTLV Lobak; voie, contrôle négatif; voie, nouvellement identifiée HTLV / GabL; voie, nouvellement identifiés HTLV-GabL C et D, Arbres phylogénétiques non racinés générés avec la méthode d’assemblage voisine PAUP v basée sur une région fiscale -bp des nouvelles souches de HTLV- de GabL et GabL GenBank KU C ou -bp concaténée gag-pol Les gènes -env-tax de la nouvelle souche GabL GenBank KU D et les séquences complètes du PTLV du T-lymphotrope du primate T disponibles dans GenBank Les réplicats des valeurs bootstrap sont indiqués sur les branches de l’arbre La longueur de la branche est graduée et la barre indique les remplacements de nucléotides par site Les souches humaines et simiennes sont indiquées en rouge foncé et en noir, respectivement. Abréviation: STLV, virus T-lymphotrope simienFigure View largeTélécharger diapositives Schémas sérologiques des virus humains de type T-lymphotrope type HTLV A et B et analyses phylogénétiques des souches C et DA et B, analyse Western blot A; Tache HTLV,; Diagnostic MP et immunodosage en ligne B; Score INNO-LIA HTLV I / II; Innogenetics Lane, contrôle HTLV positif; voie, contrôle HTLV positif; voie, contrôle positif HTLV Lobak; voie, contrôle négatif; voie, nouvellement identifiée HTLV / GabL; voie, nouvellement identifiés HTLV-GabL C et D, Arbres phylogénétiques non racinés générés avec la méthode d’assemblage voisine PAUP v basée sur une région fiscale -bp des nouvelles souches de HTLV- de GabL et GabL GenBank KU C ou -bp concaténée gag-pol Les gènes -env-tax de la nouvelle souche GabL GenBank KU D et les séquences complètes du PTLV du T-lymphotrope du primate T disponibles dans GenBank Les réplicats des valeurs bootstrap sont indiqués sur les branches de l’arbre La longueur de la branche est graduée et la barre indique les remplacements de nucléotides Les souches humaines et simiennes sont indiquées en rouge foncé et en noir, respectivement. Abréviation: STLV, virus T-lymphotrope simienGabL est un chasseur d’un an vivant dans la région de Ngounié, également échantillonné dans Quand il était plus jeune, il chassait fréquemment les gorilles des plantations dévastées et a été sévèrement mordu à la cuisse gauche par un adulte gorille dos argenté en outre, il ne se souvient pas de blessures graves lors de la découpe des gorilles, des chimpanzés, ou des singes Il est curren Le plasma GabL présentait un profil HTLV très faible par le test WB Figure A, alors qu’il présentait un modèle indéterminé avec la séro-immunité en ligne, une séroréactivité faible à Envgp, une comparaison de la séquence BS de la polarité partielle, de la taxe, et Les séquences d’env ont montré que HTLV-GabL partageait seulement% à% identité avec le prototype HTLV-_CamLE Le génome complet de HTLV-GabL, obtenu avec des amplifications successives de PCR nichées et la figure complémentaire B, est -bp long GenBank KU Son organisation génétique est similaire à celle d’autres souches de PTLV comprenant les ORF de cadres de lecture ouverts gag, pro, pol, env, tax et rex, ainsi qu’un ORF antisens dans la région pX présentant une similarité avec HBZ Figure A supplémentaire pendant HTLV -_CamLE a des ORF supplémentaires dans la région pX, seuls les ORFs I-IV ont été observés dans HTLV-GabL Similaire aux autres séquences PTLV, le LTR n’a que deux séquences répétées -bp, et la protéine fiscale putative n’a pas de domaine PDZ Cependant, la protéine HTLV-GabL putative a un acide aminé supplémentaire par rapport aux autres souches PTLV. L’identité nt globale était seulement de% -%: de% pour le LTR à% pour le rex ORF Tableaux complémentaires Phylogénétique des gènes gag-pol-env-tax concaténés -bp a clairement démontré que HTLV-GabL se sépare fortement avec les séquences PTLV, bien qu’il soit très différent d’eux.

DISCUSSION

Ici, nous avons démontré la présence de l’infection par le HTLV chez les chasseurs de PSN vivant au Gabon, en Afrique centrale. Le fait que ces virus ont été trouvés exclusivement chez des personnes sévèrement mordues par un gorille et non chez des personnes mordues par un chimpanzé / un petit singe. suggère la transmission zoonotique de ce rétrovirus à l’homme par une piqûre de ces animaux La présence d’une infection à HTLV de génotype b le sous-type présent chez les gorilles chez les chasseurs infectés par HTLV GabL, ainsi qu’une infection par un virus SFV a gorille principalement présents dans la salive et donc presque exclusivement transmis par des piqûres sévères, renforce fortement l’origine zoonotique très probable de l’infection par le HTLV chez ce chasseur. Les morsures sont survenues des années avant la collecte des échantillons sanguins et des années chez les chasseurs. la persistance chronique de ce virus chez l’homme, ce qui est le cas pour les autres rétrovirus humains HTLV- et le virus de l’immunodéficience humaine de type a nd type Nos données démontrent également la persistance chronique du HTLV chez les gorilles sans variabilité génétique évidente pendant des années. GabL est infecté par une souche divergente HTLV- avec une variabilité globale d’environ% au niveau des nucléotides par rapport à la seule autre souche connue HTLV- Cette nouvelle souche peut donc être provisoirement considéré comme la souche prototypique du génotype b du HTLV- avec l’original sous-type aGabL ayant une très faible sérologie HTLV- alors que le seul autre humain infecté par le HTLV connu et les quelques gorilles infectés par le STLV présentaient une Sérologie HTLV- ou indéterminée Cela souligne la nécessité de développer de meilleures méthodes sérologiques pour détecter et discriminer les infections à PTL. Des études complémentaires sur les gorilles et les populations humaines exposées aux PSN sont nécessaires pour évaluer la prévalence du PTLV chez les gorilles et les humains. En conclusion, notre étude renforce le fait que les gorilles devraient maintenant être considéré comme un réservoir clé pour les agents infectieux qui peuvent être transmis à l’homme

Remarques

Soutien financier Ce travail a été soutenu par l’Institut Pasteur et le programme Investissement d’Avenir, dans le cadre d’un programme de recherche du Laboratoire d’Excellence LabEx: Biologie Intégrative des Maladies Infectieuses Emergentes LR soutenu par la Bourse de l’Ecole Normale Supérieure, Faculté Paris Diderot CF a été soutenu par l’UE PF EDENext n ° et EMPERIE n ° EB soutenu par le Service de Coopération et d’Action Culturelle de l’Ambassade de France à Yaoundé au Cameroun, l’Institut National pour le Cancer et le Virus Cancer Association de Prévention à Paris, France Prof. Guy de Thé La partie de l’étude qui a eu lieu au Gabon a été soutenue par le Centre International de Recherches Médicales de Franceville, financé par le Gouvernement Gabonais, Total Gabon et le Ministère des Affaires Etrangères. Auteurs: Aucun conflit d’intérêt potentiel Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits potentiels de conflits d’intérêts t que les éditeurs jugent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués