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Myosite à Corps Inclusion Sporadique Chez Une Patiente Atteinte De Myélopathie De Type De Virus De Leucémie Humaine Humaine

Myosite à corps d’inclusion sporadique est une maladie de pathogenèse inconnue dans laquelle une étiologie virale a longtemps été suspectée Nous rapportons un cas survenu chez un patient avec une myélopathie associée à un type de virus de leucémie à lymphocytes T humains Le diagnostic a été confirmé par des études histopathologiques du muscle deltoïde. l’amplification des acides et l’hybridation in situ ont indiqué la présence d’ADN proviral intégré et de transcrits d’ARNm viral dans les lésions

Le virus de la leucémie de type HTLV et le virus spumeux humain, ou par co-infection avec le VIH et le HTLV-HTLV, provoquent diverses maladies, y compris un syndrome neurologique appelé “paraparésie spastique tropicale / myélopathie associée au HTLV” TSP / HAM [, La participation musculaire associée à l’infection par HTLV a été signalée tant chez des patients atteints de TSP / HAM que chez des patients infectés par le HTLV sans atteinte neurologique Biopsies des caractéristiques musculaires de la myosite avec infiltrats interstitiels mononucléaires, nécrose et régénération la pathogenèse de cette polymyosite n’a pas été clairement comprise; On pense que des facteurs viraux et de l’hôte, comme la réponse immunitaire, sont impliqués dans l’ADN proviral du HTLV et que des antigènes viraux ont parfois été détectés dans des cellules mononucléées infiltrantes La détection du provirus dans les myofibres est encore controversée. La polymyosite associée n’est pas causée par un effet viral direct, mais plutôt par un processus induit par les cellules T déclenché par l’activation des cellules inflammatoires infiltrantes présentes dans les lésions focales. Par conséquent, la pathologie musculaire peut être le résultat d’une réponse auto-immune ou dommages occasionnés aux myofibres myosite à corps d’inclusion sporadique sIBM est une forme distincte de myopathie inflammatoire chronique de pathogenèse inconnue pour laquelle une étiologie virale a souvent été suspectée Les lésions sont caractérisées par des fibres musculaires vacuolisées contenant des paires de filaments hélicoïdaux similaires à ceux de la maladie d’Alzheimer Plusieurs protéines caractéristiques des plaques ou des lésions du cerveau des patients atteints de la maladie d’Alzheimer des maladies, telles que la protéine β-amyloïde, τ et l’apolipoprotéine E, sont présentes dans les myofibres vacuolisées Pour des raisons inconnues, la protéine prion et l’ARNm sont également anormalement accumulés dans les vacuoles. La coloration immunocytochimique de l’ubiquitine peut aider à différencier sIBM de polymyosite Association de sIBM avec HTLV-infection a été récemment suggéré, mais il reste peu documenté À notre connaissance, seuls les patients avec une telle association ont été décrits Dans le premier cas , sIBM est survenue chez un patient avec le TSP / HAM, mais le diagnostic de ce cas était basé uniquement sur les résultats de la microscopie optique sans données microscopiques électroniques. Le second cas n’a été brièvement rapporté que dans un résumé. Ici, nous décrivons un patient caribéen qui a développé un sIBM associé à un TSP. / Syndrome HAM Le cas est bien documenté sur le plan clinique, pathologique et virologique. Nous discutons du rôle potentiel de l’infection par le HTLV dans la pathogenèse de ce cas. La patiente était une Martinique antillaise occidentale âgée d’un an qui se plaignait d’asthénie, de douleurs au bas du dos et de sciatique. Elle a d’abord ressenti une faiblesse progressive touchant les muscles inférieurs des membres proximaux, associée à une Faiblesse musculaire des membres supérieurs En plus de la faiblesse proximale symétrique des membres, le patient avait des réflexes vifs avec signe bilatéral de Babinski. Il n’y avait pas d’antécédents familiaux de maladie neuromusculaire ni de facteurs de risque connus, sauf que le patient venait d’une région endémique. HTLV- et a été nourri au sein à la naissance Des titres élevés d’anticorps anti-HTLV ont été détectés à la fois dans le plasma et le LCR par des tests d’immunofluorescence spécifiques des cellules MT qui produisent le plasma d’antigènes HTLV, / ,; CSF, Western Blot a confirmé, à la fois dans le plasma et le CSF, le schéma complet et la spécificité de la réactivité des anticorps dirigés contre les antigènes Gag p, p et Pr et Env GD et MTA-HTLV- En outre, les séquences obtenues à partir du PCR amplifié Les produits de la répétition terminale longue HTLV démontrent que le HTLV-qui était présent dans le muscle appartenait au sous-type moléculaire A cosmopolite. Les données biologiques indiquaient une légère élévation du taux sérique de créatine phosphokinase des enzymes musculaires, IU / L; niveau d’aldolase, UI / L [niveau normal, & lt; IU / L] Le patient a été traité avec de la lévothyroxine μg / jour pour la thyroïdite de Hashimoto IRM du cerveau et la moelle épinière a donné des résultats normaux L’analyse du LCR a montré une augmentation du taux d’IgG intrathécale L’électromyographie montre un profil myogénique dans les muscles deltoïdiens et proximaux des membres inférieurs. motif neurogène dans le muscle quadriceps et conduction sensorimotrice normale Une amélioration transitoire de l’évolution clinique du patient a été observée dans; après un traitement iv par IgG, des études microscopiques en microscopie optique et électronique ont montré des infiltrats lymphocytaires et macrophagiques interstitiels légers et des fibres musculaires vacuolisées dispersées. Il y avait de petites fibres angulaires, peu de fibres hypertrophiques, peu de fibres nécrotiques ou régénérantes, Figure A, B Les figures de l’étude ultrastructurale C, D ont révélé des vacuoles autophagiques typiques contenant des filaments de nm de diamètre et un stockage modéré de glycogène et de lipides.

Figure Vue largeDownload slideAtlas de microscopie optique et électronique A et B, Examen histologique d’un échantillon de biopsie de muscle deltoïde d’un patient qui était séropositif pour le grossissement du type de leucémie à cellules T humaine × sections de semithine colorées au bleu de toluidine montrent la présence de fibres angulaires atrophiques et infiltration de cellules inflammatoires A; immunomarquage montrant la présence de dépôts d’ubiquitine dans les fibres vacuolées B C, les micrographies électroniques montrent des vacuoles autophagiques qui contiennent des filaments anormaux dans les fibres musculaires acétate d’uranyle citrate de plomb; grossissement, × D, grossissement supérieur × ,, montre des amas de filaments intracytoplasmiques de nm de diamètreFigure View largeTélécharger DiapositiveAperçu en microscopie optique et électronique A et B, Examen histologique d’un spécimen de biopsie musculaire deltoïde d’un patient séropositif pour le virus de la leucémie T humaine grossissement de type, × sections de la sémiine colorées avec du bleu de toluidine montrent la présence de fibres angulaires atrophiques et l’infiltrat de cellules inflammatoires A; immunomarquage montrant la présence de dépôts d’ubiquitine dans les fibres vacuolées B C, les micrographies électroniques montrent des vacuoles autophagiques qui contiennent des filaments anormaux dans les fibres musculaires acétate d’uranyle citrate de plomb; grossissement, × D, grossissement supérieur × ,, montre des amas de filaments intracytoplasmiques de nm de diamètre. Les données immunohistochimiques ont indiqué que les macrophages HLA-DR et CD figuraient A, B, ainsi que les lymphocytes CD C et CD présents dans les infiltrats inflammatoires du lésions musculaires L’immunoréactivité des composants du complément C, C et Cb était également présente dans les infiltrats inflammatoires mais pas dans les fibres musculaires. Données non présentées Aucune réactivité avec l’anticorps polyclonal anti-Tax n’a pu être détectée dans les cellules inflammatoires

Figure Vue largeDownload slideCaractérisation de l’infiltrat inflammatoire par immunocytochimie Sections congelées fraîches série -mm-épaisseur ont été fixés dans l’acétone et traitées pour la détection des macrophages HLA-DRA et CDB CD sous-ensemble a été détecté par l’utilisation de NU-TH / anticorps C Caractérisation de l’infiltrat inflammatoire par immunocytochimie Des sections congelées fraîches de série -mm-épaisse ont été fixées dans de l’acétone et traitées pour la détection des macrophages HLA-DRA et CDB Les sous-populations de lymphocytes T ont été détectées dans de l’hématoxyline de Harris. par l’utilisation de NU-TH / anticorps C Des coupes de tissu ont été contre-colorées avec Harris hématoxyline et ont été montés dans Eukitt Grossissement, × isolement simultané de l’ADN et l’ARN du même échantillon de biopsie de muscle deltoïde a été réalisée en utilisant TRI-Reagent Molecular Research Center provirus intégré, un fragment d’ADN de la taxe de la séquence ATP bp, les nucléotides – était amplifié De plus, pour détecter l’expression de l’ARNm de HTLV taxée épissée, l’ADNc a été synthétisé à partir de mg d’ARN total en utilisant la transcriptase inverse du virus de la myéloblastose aviaire avec randomisation. hexamères A -bp fragment de la position ‘du site donneur d’épissage fiscal à la position a été amplifié pour des cycles avec Taq ADN polymérase et – ng d’ADNc Dans les deux cas, les produits amplifiés ont été détectés par hybridation par transfert de Southern avec une sonde spécifique oligonucléotidique P-marqué. l’échantillon de biopsie musculaire était positif à la fois pour l’ADN proviral du HTLV et pour la détection de l’ARNm de la taxe, comme l’indiquent la PCR et l’analyse par PCR de la transcriptase inverse.

amplification de la transcriptase-PCR obtenue avec un ADNc prélevé sur un échantillon de biopsie de muscle deltoïde et des témoins positifs et négatifs, respectivement B et C, détection d’ARNm de HTLV-I par hybridation in situ avec des ribosondes de taxon P et de sens coupes de muscle deltoïde Après hybridation avec une ribosonde de taxis antisens, une positivité focale du HTLV-I a été observée à l’extérieur des fibres musculaires dans les cellules inflammatoires, près du vaisseau sanguin musculaire. Le temps d’exposition était de 10 jours. Après des jours d’activation in vitro, l’hybridation in situ a été réalisée sur des cellules mononucléaires du sang périphérique du patient, en utilisant des ribosondes antisens D et Sens Etax. Le temps d’exposition était de jours. Les lames ont été colorées au Giemsa et ont été montées en grossissement Eukitt. – la réplication a lieu au sein des lésions musculaires, l’hybridation in situ a été réalisée comme décrit ailleurs P antisense et se Les ribosondes nse qui correspondaient à l’ARNm complet ont été dérivées des promoteurs T et T du vecteur de transcription Bluescript. La sonde antisens tax a été choisie car tous les types d’ARN-HTLV-génomiques ainsi que les hybrides à simple ou double épissage s’hybrident à cette région. Génome viral Pour obtenir un signal spécifique, l’hybridation in situ a été réalisée avec des conditions d’hybridation et de lavage très strictes. Le temps d’exposition était de – jours pour × cpm / glissière Non ou faible bruit de fond dans ces expériences d’hybridation in situ Des cellules HTLV infectées qui présentaient un signal d’ARNm HTLV spécifique ont été détectées dans des cellules inflammatoires en dehors des fibres musculaires. Figure B Comme témoins, dans des coupes musculaires adjacentes, l’hybridation in situ effectuée avec une ribosonde sensorielle n’a pas donné de signaux détectables. chez les patients avec HAM / TSP, la réplication virale semble être maintenue à un niveau restreint d’hybridation in situ effectuée sur des pe activés in vitro Dans cette étude, nous rapportons un cas typique de SIBM chez un patient caribéen avec TSP / HAM. Les résultats d’études cliniques, biologiques et électromyographiques étaient en accord avec le diagnostic de sIBM, qui a été confirmé par des études microscopiques du muscle deltoïde montrant de légers infiltrats lymphocytaires et macrophagiques interstitiels et des myofibres vacuolisées dispersées avec des inclusions ubiquitin-positives. En outre, une étude ultrastructurale a montré des vacuoles autophagiques typiques contenant des filaments de nm de diamètre. L’analyse par transcriptase-PCR a montré la présence d’ADN proviral HTLV intégré du sous-type moléculaire cosmopolite et des transcrits d’ARNm viral dans les lésions pathologiques du muscle deltoïde. En outre, l’hybridation in situ a montré quelques cellules avec un signal de mRNAT fiscal. clinique, pathologique et Les profils immunologiques de sIBM observés chez les patients infectés par HTLV sont similaires à ceux de sIBM chez les patients non infectés par le rétrovirus . Cependant, le mécanisme par lequel le HTLV peut déclencher la maladie reste incertain. Le faible niveau de transcription HTLV seulement dans les cellules infiltrantes indique que HTLV- ne provoque pas une infection persistante des fibres musculaires Aucune réactivité n’a été détectée avec l’utilisation de l’anticorps anti-Tax, probablement par rapport au faible niveau d’expression des protéines virales dans les tissus infectés, comme indiqué pour D’autres maladies associées au HTLV, telles que la TSP / HAM, la polymyosite et la leucémie à cellules T chez l’adulte, ont également conclu que le HTLV- n’infecte pas directement le muscle, sur la base de l’infection par le HTLV. base de l’absence de détection de HTLV-gag p dans les myofibres des patients Dans ces cas, aucune hybridation in situ n’a été réalisée. Nous avons détecté des composants du complément dans l’infiltrat focal. mais pas sur la microvascularisation, comme décrit pour la dermatomyosite , ou sur les fibres musculaires, comme le montre la myopathie vacuolaire liée à l’X Nos données, et celles précédemment publiées ailleurs, font l’hypothèse que tel IBM est déclenché par infiltration mononucléaire cellules persistantes infectées par HTLV-, car aucun composant viral n’a été retrouvé dans les fibres musculaires. Par conséquent, la pathogenèse de cette sIBM particulière peut nécessiter une infection rétrovirale persistante et l’activation d’une réponse inflammatoire antivirale ou antimusculaire. Une activation immunitaire généralisée ou localisée les muscles, provoqués par HTLV – conduisant à des niveaux accrus de cytokines et à une meilleure expression des molécules d’adhésion cellulaire , pourraient être impliqués dans le développement des lésions focales observées dans le spécimen de biopsie musculaire. Des facteurs tels que la sécrétion de cytokines induite par l’infection par le HTLV seront d’un intérêt majeur dans l’étude du HTLV-lin. ked pathologie

Remerciements

Nous remercions F. Bernard, M C Cumont, F Levi-Acobas, et M C Rouché, pour l’assistance technique, et Lüder Behrens, pour la lecture critique du manuscrit et les discussions utiles